| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 1491-2 | ||||
Resumo:Neisseria meningitidis (Nm) ou meningococo é o agente causador da doença meningocócica. Diferenças na composição da sua cápsula polissacarídica permitem a classificação da Nm em 12 sorogrupos distintos. A caracterização genética de isolados de meningococos é extremamente importante para o monitoramento epidemiológico da doença meningocócica (DM), através da identificação de clones epidêmicos circulantes, a fim de subsidiar ações específicas de Vigilância Sanitária para contenção de surtos. Esse monitoramento epidemiológico é realizado em diferentes países através da técnica de Multilocus Sequence Typing (MLST). No Brasil, o MLST não é realizado rotineiramente devido ao seu custo elevado. No entanto, métodos baseados na qPCR podem ser utilizados para o mesmo fim, com redução dos custos e maior facilidade de processamento quando comparados ao sequenciamento de DNA. O objetivo desse estudo foi estabelecer uma estratégia para o controle epidemiológico da Nm através da detecção de assinaturas genéticas em genes do MLST pelo método de high-resolution DNA melting analysis (HRM) para identificar os principais clones hipervirulentos circulantes no país. No total, 920 reações de qPCR-HRM foram realizadas no termociclador Thermo Fisher QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems e 1.082 reações foram realizadas no QuantStudioTM 7 Flex Real-Time PCR Systems. Os genes testados foram abcZ, adk, aroE, fumC, gdh e pdhC e os resultados obtidos foram semelhantes nos dois equipamentos. A porcentagem na detecção dos alelos testados para cada complexo clonal ficou entre 77% e 100% de acerto. Após busca ativa no PubMLST verificou-se que ao inserir nesse banco de dados resultados de ao menos quatro alelos, foi possível determinar o complexo clonal em 99% a 100% das amostras depositadas no banco. Os resultados obtidos neste estudo sugerem que é possível identificar os complexos clonais de Nm através da análise da temperatura das curvas de melting (TM) geradas por HRM. Essas informações podem auxiliar na vigilância epidemiológica e nas estratégias de vacinação para evitar a disseminação de novos clones hipervirulentos.
PALAVRAS-CHAVE: clones hipervirulentos, controle epidemiológico, HRM, Neisseria meningitidis.
Palavras-chave: clones hipervirulentos, controle epidemiológico, HRM, MLST, Neisseria meningitidis Agência de fomento:Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) | |||||